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MTT檢測細胞增殖凋亡是檢測細胞生存的一種方法
發布時間:2017-12-20 點擊次數:693次
   MTT檢測細胞增殖凋亡是生物體的重要生命特征,細胞以分裂的方式進行增殖。單細胞生物,以細胞分裂的方式産生新的個體。多細胞生物,以細胞分裂的方式産生新的細胞,用來補充體内衰老或死亡的細胞;同時,多細胞生物可以由一個受精卵,經過細胞的分裂和分化,zui終發育成一個新的多細胞個體。必須強調指出,通過細胞分裂,可以将複制的遺傳物質,平均地分配到兩個子細胞中去。可見,細胞增殖是生物體生長、發育、繁殖和遺傳的基礎。
  
  MTT檢測細胞增殖凋亡,染色體DNA雙鍊斷裂或單鍊斷裂而産生大量的粘性3'-OH末端,可在脫氧核糖核苷酸末端轉移酶(TdT)的作用下,将脫氧核糖核苷酸和熒光素、過氧化物酶、堿性磷酸酶或生物素形成的衍生物标記到DNA的3'-末端,從而可進行凋亡細胞的檢測,這類方法稱為脫氧核糖核苷酸末端轉移酶介導的缺口末端标記法。由于正常的或正在增殖的細胞幾乎沒有DNA的斷裂,因而沒有3'-OH形成,很少能夠被染色。MTT檢測細胞增殖凋亡實際上是分子生物學與形态學相結合的研究方法,對完整的單個凋亡細胞核或凋亡小體進行原位染色,能準确地反應細胞凋亡典型的生物化學和形态特征,可用于石蠟包埋組織切片、冰凍組織切片、培養的細胞和從組織中分離的細胞的細胞形态測定,并可檢測出極少量的凋亡細胞,因而在細胞凋亡的研究中被廣泛采用.
  
  MTT檢測細胞增殖凋亡又稱MTT比色法,是一種檢測細胞存活和生長的方法。其檢測原理為活細胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶能使外源性MTT還原為水不溶性的藍紫色結晶甲瓒并沉積在細胞中,而死細胞無此功能。二甲基亞砜能溶解細胞中的甲瓒,用酶聯免疫檢測儀在490nm波長處測定其光吸收值,可間接反映活細胞數量。在一定細胞數範圍内,MTT結晶形成的量與細胞數成正比。該方法已廣泛用于一些生物活性因子的活性檢測、大規模的抗腫瘤藥物篩選、細胞毒性試驗以及腫瘤放射敏感性測定等。它的特點是靈敏度高、經濟。

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